公司名稱:寧波立誠儀器有限公司
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超聲波細胞粉碎機的常見問題和解決方案
超聲波細胞破碎直接沉淀直接加入樣品1b緩沖液,加入5ul巰基乙醇,混勻,離心,煮沸10min,直接加載,染色和脫色步驟如下:將膠水放入適量染色中在微波爐中液體1分鐘(以下)可以進行適當的乙酸添加,并且可以在微波爐中用大量的水(自來水)代替染色溶液10分鐘。
超聲波系列的超聲細胞破碎器在表達重組蛋白后超聲破碎細胞,使用400w冰浴,破碎2s 1s,但在短時間內產生大量泡沫,影響破碎力量。 pbs和tris緩沖區都是這樣的。它沒有完全破碎,我感興趣的蛋白質就在這些完整的細胞中。
1.由于未設置探頭位置,將生成氣泡。探頭必須靠近底部,大約1厘米(我通常距離底部0.5毫米)。功率會因儀器而異,但您可以觀察液位,波動但不太強烈。
2.打破3S停止10S,打破二三十次看。
3.還要注意喇叭的位置。如果聲音錯誤,應及時調整。另外,從細菌濃度的觀點出發可以考慮。壓碎時盡量增加體積,強度*不應超過60%。
4.嘗試8s 8s。對于某些細菌蛋白質,您的方法很難散熱,導致蛋白質變性產生氣泡。 暫停時間稍長。這在包涵體的形式中更為常見。
鏈霉菌(放線菌)超聲處理(超聲細胞破破壞)的條件是什么?
預處理通常是配置成一定濃度的細菌懸浮液。
使用超聲波破壞時使用的具體條件是:
(1)取約的24h培養液,以5000r / min離心5min,收集細菌。
(2)用pH7.5的Na2HPO-NaH2PO緩沖液洗滌3次,然后用緩沖液制備1:3的細菌懸浮液。放在40
mL大型塑料試管。
(3)(超聲波破碎機)將大塑料試管放入冰浴中,用超聲波破碎(功率200W,1/2“探頭,壓碎30s,間歇30S)。
(4)將破碎的液體以12,000r / min的速度高速離心30分鐘,收集細胞碎片和上清液。